賽默飛2720PCR儀是一種在DNA擴增反應中，以熒光化學物質測每次聚合酶鏈式反應（PCR）循環(huán)后產物總量的方法。通過內參對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。

 

　　數字PCR是近年來迅速發(fā)展起來的一種定量分析技術。該技術結果判定不依賴于擴增曲線的循環(huán)閾值（Ct），不受擴增效率的影響，具有很好的準確度和重現性，并且可以實現定量分析。數字PCR已經在核酸檢測、鑒定等研究領域顯示出巨大的技術優(yōu)勢和應用前景。

 

　　定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量，而數字PCR則讓你能夠直接數出DNA分子的個數，是對起始樣品的定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領域：拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究（如等位基因不平衡表達）、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。

 

　　賽默飛2720PCR儀技術中為什么3次循環(huán)才能得到目的基因？

 

　　1、第1個循環(huán)擴增出來的新片段很長很長。

 

　　2、第2個循環(huán)以新的長片段為模板進行，但新片段的一端是引物開頭的，所以第2個循環(huán)得到的片段就是我們需要的長度，但只是一條鏈，所以還不能分離出目的基因。

 

　　3、第3個循環(huán)，當以第2個循環(huán)得到的新片段為模板時，因為這個片段的長度就是需要擴增的長度，當第三個循環(huán)完成時，這個片段是需要的長度，且是雙鏈DNA，這就得到了需要的目的基因了。